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    人ELISA試劑盒的相應的解決辦法
    更新時間:2015-07-10   點擊次數:3012次

        人ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用,但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,人ELISA試劑盒有可能導致顯色不全、花板等結果。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給同行帶來一些啟發,提高試驗質量。

     1 選擇試劑 選擇質量優良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。

     2 加樣 可能原因:

     1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;

     2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時);

     3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。

     解決辦法:

     1)標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,人ELISA試劑盒采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。

     2)加樣后及時放入孵箱。

     3)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

     4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

     5) 標本較多時,請分批操作。

     3 孵育 可能原因:

     1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發,吸附于孔壁,難于清洗*;

     2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。 

    解決辦法:

     1) 貼封片或加蓋;

     2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。

    4 洗板 可能原因:

     1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。

     2) 采用半自動洗板機洗板時,人ELISA試劑盒洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。

     3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 

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