更新時間:2021-10-14
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育溫度的考究:
溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫有4℃(冰箱溫度)等,37℃是試驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的適宜溫度。
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試劑盒抗體封suo就是讓大量不相關的蛋白質充填這些曠地空閑,從而排斥ELISA后的步驟中干擾物質的再吸附。但有時因為試驗的需要,包被原的特殊性也可能采用中性的緩沖溶液來包被。
實驗時常見問題及分析:兔鉤端螺旋體IgG(LepIgG)elisa試劑盒
常見問題:讀數數值低
可能原因:酶標儀設置不正確
方案對策:
① 在酶標儀上檢查波長及濾光片設置
② 提前打開酶標儀預熱
常見問題:靈敏度低
可能原因:
① ELISA試劑盒
② 保存讀數前未終止
方案對策:
① 按照說明書要求保存相關試劑
② OD讀數前應在每孔中加入終止液
上海通蔚生物一直都是注重人才素質和專業技術的服務性企業,秉著以人為本,以高滿意度為目標的經營管理理念,為客戶提供的服務。我司產品只要遵從它應有的規矩才干和好的完結試驗,就能得到更精準的實驗結果!并且售后服務有專門的技術員可以直接對接終端客戶,實行包退包換政策!
封閉液、洗滌液及保護液的優化:
封閉液的優化:
采用文獻報道的方法進行封閉。其封閉液的組成為:10mM磷酸鹽緩沖液含1%的牛血清白蛋白(BSA);
洗滌液的配制:
采用文獻報道的方法配制洗滌液
酶標板保護液的優化: 兔鉤端螺旋體IgG(LepIgG)elisa試劑盒
酶標板經過封閉后在低溫下僅能存放2周左右,為了延長固相酶標板上抗原的穩定性,我們增加了一步保護酶標板的程序;在10mM的磷酸鹽中加入適量的糖、無關蛋白質、慶大霉素以及二價金屬離子,作為酶標板保護劑,在封閉完后加入保護液于4℃冰箱中孵育放置一個晚上。
同時與未做保護的酶標板進行對照,然后將保護的及未保護的酶標板置于37烘箱中放置15天,考察保護液對酶標板的穩定性的影響。
試劑盒包被原的性質很重要,蛋白濃度,是否降解,這關系到你做出的試劑盒抗體可不可以被其識別,所以保留抗原很重要,做重組蛋白時,技術員都嚴格警告一定要在冰浴下緩慢融化就是這個道理。
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